微生物膜是一種高度敏感的生物傳感材料或過(guò)濾介質(zhì)，廣泛應(yīng)用于微生物檢測(cè)、膜生物反應(yīng)器（MBR）、細(xì)胞培養(yǎng)及生物傳感器中。它不僅能夠截留微生物，還能為微生物群落提供附著生長(zhǎng)的微環(huán)境，實(shí)現(xiàn)對(duì)生物活性的精準(zhǔn)調(diào)控。掌握
微生物膜的正確使用方法，是確保實(shí)驗(yàn)成功、數(shù)據(jù)可靠與系統(tǒng)穩(wěn)定的核心。
第一步：使用前準(zhǔn)備與環(huán)境確認(rèn)
在潔凈、無(wú)菌的環(huán)境下操作，避免外源微生物污染。檢查微生物膜包裝是否完好，確認(rèn)在有效期內(nèi)。根據(jù)用途選擇合適類型：
檢測(cè)用膜：如0.45μm或0.22μm孔徑的醋酸纖維素（CA）或聚醚砜（PES）濾膜，用于水樣中細(xì)菌的富集。
生物載體膜：如聚氨酯泡沫、陶瓷膜或改性纖維膜，用于生物膜反應(yīng)器中微生物的固定化。
確保操作臺(tái)、鑷子、培養(yǎng)皿等器具已滅菌（高壓蒸汽或紫外線照射）。
第二步：膜的取出與裝載
佩戴無(wú)菌手套，用無(wú)菌鑷子從包裝中取出膜片，嚴(yán)禁手指直接接觸膜面。對(duì)于過(guò)濾應(yīng)用，將膜小心放置于無(wú)菌過(guò)濾漏斗或?yàn)V器支撐網(wǎng)上，確保膜與密封圈貼合，無(wú)褶皺或氣泡。對(duì)于生物反應(yīng)器，按設(shè)計(jì)要求將載體膜裝入反應(yīng)槽或模塊中。
第三步：樣品處理與過(guò)濾（適用于檢測(cè)膜）
將待測(cè)水樣或溶液通過(guò)真空或加壓方式抽濾。控制流速適中，避免過(guò)高壓力導(dǎo)致膜破裂或微生物損傷。過(guò)濾完成后，用少量無(wú)菌緩沖液沖洗濾器內(nèi)壁，確保微生物全部截留在膜表面。
第四步：轉(zhuǎn)移與培養(yǎng)
過(guò)濾后，用無(wú)菌鑷子將膜輕輕轉(zhuǎn)移到預(yù)置的固體培養(yǎng)基（如營(yíng)養(yǎng)瓊脂、m-Endoagar）上，膜與培養(yǎng)基接觸。對(duì)于倒置培養(yǎng)法，確保膜面朝上，防止滑動(dòng)。蓋好培養(yǎng)皿，標(biāo)記樣品信息。
第五步：培養(yǎng)條件控制
將培養(yǎng)皿放入恒溫培養(yǎng)箱，按目標(biāo)微生物要求設(shè)定溫度與時(shí)間：
總大腸菌群：37±1℃，24小時(shí)。
糞大腸菌群：44.5±0.2℃，24小時(shí)。
保持濕度，防止培養(yǎng)基干裂。避免陽(yáng)光直射，防止非目標(biāo)菌生長(zhǎng)。
第六步：結(jié)果觀察與計(jì)數(shù)
培養(yǎng)結(jié)束后，觀察膜表面菌落形態(tài)、顏色與數(shù)量。典型菌落（如金屬光澤、紅色中心）可初步判定。使用菌落計(jì)數(shù)器進(jìn)行精確計(jì)數(shù)，結(jié)果以CFU/100mL表示。
第七步：生物膜反應(yīng)器中的活化與運(yùn)行（適用于載體膜）
新裝載體膜需進(jìn)行“掛膜”啟動(dòng)：注入富含營(yíng)養(yǎng)的污水與接種污泥，在低負(fù)荷下連續(xù)曝氣7-14天，使微生物在膜表面形成穩(wěn)定生物膜。運(yùn)行期間控制溶解氧、pH、溫度與水力停留時(shí)間，維持生物活性。
第八步：使用后處理
一次性檢測(cè)膜使用后應(yīng)高壓滅菌（121℃,30分鐘）后按醫(yī)療廢物處理。可重復(fù)使用的載體膜需清洗（反沖洗或化學(xué)清洗），去除老化生物膜與污垢，恢復(fù)通量。
更新時(shí)間：2025-10-22 
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